AM-AM-FS-Ac-17015 蟹肉中的氨

AMAMFSAc17015  蟹  氨  比色法

AM-AM-FS-Ac-17015

蟹肉中的氨

1.试剂

    (全部用无氨的水；普通蒸馏水可用)

    (a)溴溶液——用水稀释10mlNaOH溶液(1+1)到约100ml时，加1ml溴，振摇，用水稀释到200ml。溶液当天配制。

    (b)麝香草酚溶液——10%的乙醇溶液，溶液当天配制。

    (c)稀NaOH溶液——25mlNaOH溶液 (1+1)，用水稀释到100ml。

    (d)氨的标准溶液——40mg/ml，在水中溶解0.314g预先于100℃干燥1h的NH₄Cl并稀释到100ml，取4.0ml放入100ml的容量瓶中，用水稀释到刻度。

2.试验过程

2.1.样品的制备

    如需要，去壳，用食品绞肉机绞三遍，每次绞后混匀。

2.2.测定

    放20g制得的样品到500ml磨口锥形瓶中，加180ml 2.5%的磷钨酸溶液，剧烈振摇2min，用Whatman 1号或等效的滤纸过滤到250ml的磨口锥形瓶里。吸取2ml滤液(相当于0.2g样品)于125ml分液漏斗中，保存剩下的滤液。向另一分液漏斗里加2.0ml 2.5%的磷钨酸溶液作空白对照。

    每个分液漏斗加入8ml水，然后，立即连续地加入1.0ml稀NaOH溶液(c)，旋摇混匀；2.0ml麝香草酚溶液(b)，旋摇混匀；约分30次加入5.0ml溴溶液(a)，每次加后，剧烈旋摇。剧烈震荡1min。在进行下一操作之前，按样品或标样次序，顺序向每个分液漏斗加进全部的试剂，静置≥20min。

    向每个分液漏斗加入20ml正丁醇，剧烈振摇1min，静置20min。排出水层，使正丁醇通过下部用玻璃棉塞住、上部装有约30g无水硫酸钠的玻璃漏斗进入磨口锥形瓶。以1cm比色皿参比空白，在约680nm处测定溶液的最大A(吸光度)值。

    如A值大于氨标准溶液的最高含量的吸光度，用2.5%的磷钨酸定量稀释剩下的滤液，使2ml的稀释液产生低于该水准的A值。

2.3.标准曲线的绘制

    吸取0，1，2，3，4和5ml标准氨溶液，分别放入125ml分液漏斗。各加入2.0ml磷钨酸溶液并用水稀释至10.0ml，按C进行。以零溶液参比，如上，测定每一溶液的最大A值。绘制标准曲线。

3.来源

AOAC   官方方法973.25（第17版）