AM-AM-FS-Ac-12029 食品和饮料中的水杨酸

AMAMFSAc12029  食品  饮料  水杨酸  过滤法

AM-AM-FS-Ac-12029

食品和饮料中的水杨酸

1.试验过程

1.1.提取

转移100ml样品或量取按12-27((a)不含酒精的饮料——许多饮料不经进一步处理就可以按12-28A或12-29A所述的方法直接提取。如果在提取中间出现麻烦的乳化物，则吸取100ml溶液放入250ml容量瓶中，加入约5gNaCl，摇到溶解为止。用乙醚稀释至刻度，猛烈振荡，放置10min，其间偶而摇一下，过滤，然后按 (b)所述处理一份滤液。(b)含酒精饮料——用约10%NaOH溶液调节200ml样品溶液到对石蕊试纸显碱性，然后在蒸汽浴上蒸发到约为原来体积的1/3。用水稀释至原来的体积。如有必要就过滤一下。(c)固态或半固态物质——研磨样品，充分混匀。转移适当的量(根据样品粘稠程度取约50—200g)放入500ml容量瓶，加水稀释至约400ml，振荡至混合物成为均匀的液体。加入到2—5gCaCl₂摇到其溶解。用约10%NaOH溶液调至溶液对石蕊试纸显明显碱性，用水稀释至刻度，充分振荡，放置≥2h，其间不时摇动，然后过滤。)制备的代表≥20g原物料的溶液，放入分液漏斗中。如果是碱性，用HCl(1+3)调节到对石蕊试纸显中性后，再使每100ml溶液过量2ml HCl。用乙醚提取4次，每次使用的乙醚体积相当于水溶液的1/2。如果在振荡时发生乳化现象，通常加入少量(乙醚体积的1/5)石油醚(bp<60℃)破乳，再次振荡，或离心。如果仍有少量乳化，则让其和水层一起保留下来，常常在下次提取中会消除。如果在第四次提取后仍有乳化现象，则将它从清晰的乙醚层和清晰的水层中分离出来，单独用少量乙醚提取二三次。

    合并乙醚提取液，用相当于总体积的1/10的水洗涤，放置分层，弃去水层。照此方式洗涤直到放出的水相在加入甲基橙和2滴0.1M NaOH后产生黄色为止。慢慢蒸去大部分乙醚，将残余物转移至瓷盘上，让其自然挥发。如果不存在干扰物质，按B所述操作；如果有干扰物质，用下述方法之一纯化残余物：

    (a)在H₂SO₄上方以真空彻底干燥残余物。用每份10—15mlCS₂或石油醚(bp<60℃)提取10次，用玻璃棒摩擦盘中的物质，然后用干滤纸将几份溶剂连续过滤到瓷盘里。用滴加2%铁矾溶液试验提取的残余物，如果出现水杨酸反应，把残余物溶于水；用HCl(1+3)酸化溶液，用乙醚提取，蒸发，再用CS₂或石油醚提取此干的残余物，然后加入到第一次的提取液中，蒸去大部分CS，或石油醚，让剩余溶剂自然挥发。按B操作。

    (b)将残余物溶于40-50ml乙醚里，转移乙醚溶液到分液漏斗里，并用3份15ml 1%NH₄· H₂O提取。(如果已知在原来的乙醚提取物中有脂肪，就不用3份而用4份1%NH₄·H₂O提取。)合并提取的碱性水相，酸化，再用乙醚提取，按前述办法洗涤合并后的乙醚提取物。慢慢蒸去大部分乙醚，让剩余乙醚自然挥发。

1.2.测定

    用少量热水溶解残余物A，冷却后，稀释至一定的体积(通常是50或100ml)。如果溶液不清，则用干燥滤纸过滤。稀释几份溶液，然后用0.5%FeCl₃或2%的铁矾溶液处理，直到产生最深的颜色。通常加几滴就够了。

    (应该将铁矾溶液煮沸至出现沉淀，放置后过滤。经这种处理，溶液的酸度会稍有增加，但溶液保持清晰的时间相当长，并且在用水稀释时很少或不出现混浊。当用未煮沸的溶液时，颜色不会立即出现。产生混浊对准确观察颜色有干扰。)

    将用同样方法处理的水杨酸标准溶液(50ml水含1mg水杨酸)的颜色与样品的颜色相比较，比较时使用奈斯勒管或比色计。无论哪种情况，要避免试剂过量，尤其是FeCl₃的溶液。即使50ml用来比较的水杨酸溶液可能含有过量的2%铁矾溶液0.5ml，仍不会导致错误的结果。

2.来源

AOAC官方方法 975.31 （第17版）