AM-AM-FS-Ac-19011 糖及糖浆中的蔗糖

AMAMFSAc19011  糖  糖浆  蔗糖  双稀释法

AM-AM-FS-Ac-19011

糖及糖浆中的蔗糖

1.适用范围

    适合于26g样品中不溶物及澄清剂处理时沉淀的总体积大于1ml的情况。

2.试验过程

称量13g样品，用适当的澄清剂溶液稀释到100ml(对深色糖食或糖蜜用碱式Pb(OAc)₂，对浅色糖食用矾土霜)。另称26g样品，用澄清溶液稀释至100ml。过滤上述两种溶液，测旋光度值。

(a)直接读数——溶解2倍标准重量的样品(52g)，或其一部分于200ml容量瓶的H₂O中，加必要的澄清剂，不要过量;摇动，用水稀释到刻度，混匀，过滤，在过滤过程中，漏斗上面加盖，弃去25ml初滤液。

    若使用Pb澄清剂，则在收集到足够量的滤液后往里面加无水Na₂CO₃以除去过量的Pb，每次加少量，以防止过量，混匀后再过滤，弃去25ml初滤液(不是称量52g样品到200ml容量瓶中，而是将两个26g分别溶解并稀释到100ml，处理方法如上所述。根据产品的颜色，可选用几倍或几分之几的标准重量，其结果都换算到26g/100ml下的旋光值。)

    吸取50ml无Pb滤液到100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀，用200mm管测旋光度。结果乘以2为直接读数(即下式中的P)或转化前旋光度值(如果使用400mm的测试管，则读数就是P)。若有变旋的可能，则按19-7D进行。

    (b)转化读数——首先确定使50ml无Pb滤液，对甲基红明显呈酸性的HOAc用量的体积。然后往另一个装有50ml无Pb滤液的100ml容量瓶中加入所要求体积的酸和5ml蔗糖转化酶溶液，加水到近100ml，放置过夜 (最好≥20℃)。

在20℃下冷却，并稀释到100ml。充分混匀并用200mm管在20℃下测旋光值。如果对水解是否完成有疑问，可保留部分溶液几个小时，然后再测旋光度。如果读数与前面的读数相比无变化，这说明转化已完成。认真记录读数及溶液的温度。如果有必要在非20℃下测定，可在比较窄的温度变化范围内进行。在同一温度下进行定容以及直接和转化后测定。校正转换酶的光学活性对旋光度的影响，并乘以2。计算%蔗糖S，计算公式如下:

P=标准溶液直接读数值;I=标准溶液转化后的读数;t=测定温度;m=100ml转化后的溶液中含原样品固体的克数。对液体样品，m如果样品过于浓稠而不便直接测其密度，则可称量一部分，再称量一定的水使之稀释。也可以称量一定量的样品，然后用水稀释到确定的体积。对前一种情况，总固体的百分含量由下式计算:

    未稀释样品中固体含量 (%)=WS/w

    S=稀释样品中固体的含量(%);W=稀释后样品的重量;w=被稀释样品的重量。

    当样品被稀释到一定体积时，固体的百分含量用下式计算:

    未稀释样品中固体含量 (%)=VDS/w

    式中V=在给定温度下稀释后样品体积;D=稀释后溶液在同一温度下的比重;S=稀释后溶液在同一温度下的固体百分含量;w=被稀释样品的重量。

计算可以简化，将样品和等量水混合，测溶液白利糖度，乘2，即为所求固体含量。

再乘以100ml转化后溶液中原始液体样品的重量而获得。

    (c)55—60℃下的快速转化——若需要变旋糖进行快速转化，可按下述方法进行:按(a)制备样品，往含50ml无Pb滤液的100ml容量瓶中加足够量的HOAc，使溶液对甲基红呈明显的酸性。与(b)相同，在取50ml样品之前先确定所需HOAc的量。加入10ml转化酶溶液，充分混匀，然后将容量瓶置于55—60℃的水浴中15min，并不时摇动。冷却之后，加Na₂CO₃，到溶液对石蕊试纸呈明显的碱性，在20℃下稀释到100ml，混匀，用200mm管在20℃下测旋光值。让样品在管中保留10min，再测旋光值，若读数与前面的读数相同，则证明变旋过程已结束。仔细记录读数及溶液的温度。校正转化酶光学活性的影响，并给读数乘以2，按 (b)中给出的式子计算蔗糖百分含量。

如果溶液的碱性太强，以致于使糖产生分解，那么旋光值若为负值时一般要减小，因为果糖的分解比溶液中存在的其它糖更快。但若碱度不够而不能使变旋过程很快完成，则旋光值为负值时一般会增大。对一个分析化学家来说，他有一定的经验，若他能保证自己加入足量的Na₂CO₃使变旋作用迅速完成，并且不使样品在测定之前的时间里造成任何分解，则10min之后的旋光变化测定可省去。

按 (b)，或 (c)转换每种溶液，并分别计算转换读数。

    样品的实际直接旋光度值等于稀释溶液直接旋光度值的4倍减去未稀释溶液的直接旋光度值。实际转换旋光度值等于稀释溶液转换旋光度值的4倍减去末稀释溶液的转换旋光度值。

    按照所用的转换方法，利用(b)中的公式，从实际旋光度值计算出蔗糖的含量。

3.来源

AOAC官方方法6.02