维普资讯 http://www.cqvip.com ４０・ ・Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｙａｎｂｉａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｍａｒ．２００７ Ｖｏ１．３０ Ｎｏ．１ 硫唑嘌呤致小鼠急性肝组织损伤模型的建立 廉丽花，姜英子，南极星‘ （延边大学药学院药物分析教研室，吉林延吉１３３０００） ［摘要】 ［目的】探讨硫唑嘌呤（ａＺＡ）诱导小鼠制作急性肝组织损伤模型的最佳条件．［方法】分别灌胃 给予各组小鼠５０，１００，１５０，２００ ｍｇ屯ＡＺＡ，给药后２４ ｈ测定血清中ＡＳＴ，ＡＬＴ值；分别灌胃给予各组小 鼠１５０ｍｇ／ＬＡＺＡ，给药后４，８，１２，１６，２０，２４，２８，３２ ｈ测定血清中ＡＳＴ， 值．［结果】随着给予ＡＺＡ 剂量的增加，小鼠血清中ＡＳＴ，ＡＬＴ值升高；随着给药时间的延长，小鼠血清中ＡＳＴ，ＡＬＴ值在１２ ｈ时 最高，之后逐渐下降．［结论】利用ＡＺＡ制作急性肝组织损伤小鼠模型时，ＡＺＡ的最佳给药剂量为１５０ ｒａｇ ，最佳作用时问为给药后１２ ｈ． ［关键诃】肝疾病；硫唑嘌呤；模型，动物；转氛酶类；小鼠 ［中图分类号】Ｒ９６５ ［文献标识码】Ａ ［文章编号】 １０００．１８２４【２００７）Ｏ１．００４０．０２ Ｉｎｓｔｒｉｂｕｔｉｎ ｏｆ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ａｃｕｔｅ ｈｅｐａｔｉｃ ｉｎｊ ｕｒｙ ｍｏｄｅｌ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ａｚａｔｈｉｏｐｒｉｎｅ ｉｎ ｍｉｃｅ ＬＩＡＮ Ｌｉ－ｈｕａ，ＪＩＡＮＧ Ｙｉｎｇ－ｚｉ，ＮＡＮ Ｊｉ－ｘｉｎｇ‘ （Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＡｎａｌｙｓｉｓ，Ｙａｎｂｉａｎ ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＣｏｌｌｅｇｅ ｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，Ｙａｎ／ｉ １３３０００，Ｊｉｌｉｎ，Ｃｈｉｎａ） ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ｏＢ】ＥＣＴＩＶＥ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｔｏ ｉｎｄｕｃｅ ａｃｕｔｅ ｈｅｐａｔｉｃ ｉｎｊｕｒｙ ｍｏｄｅｌ ｉｎ ｍｉｃｅ ｂｙ ａｚａｔｈｉｏｐｒｉｎｅ（ＡＺＡ）．ＭＥＴＨＯＤＳ Ｍｉｃｅ ｉｎ ｐｅｒ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｇｉｖｅｎ ５０，１００，１５０，２００ ｍｇ／Ｌ ｄｏｓｅ ｏｆ ＡＺＡ ｆｏｒ ２４ ｈｏｕｒｓ，ｔｈｅｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ＡＳＴ，ＡＬＴ ｉｎ ｓｅｒｕｍ ｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ．Ｍｉｃｅ ｉｎ ｐｅｒ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｇｉｖｅｎ １５０ ｍｇ／ｋｇ ｄｏｓｅ ｏｆＡＺＡ，ａｆｔｅｒ ４，８，１２，１６，２０，２４，２８，３２ ｈｏｕｒｓ，ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ＡＳＴ，ＡＬＴ ｉｎ ｓｅｒｕｍ ｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｔｏｏ． ＲＥＳＵＬＴＳ Ｔｈｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ＡｓＴ，ＡＬＴ ｉｎ ｓｅｒｕｍ ｉｎ ＡＺＡ－ｔｒｅａｔｅｄ ｍｉｃｅ ｗｅｒｅ ｄｏｓｅ—ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ，ａｎｄ ｔｈｏｓｅ ｒｅａｃｈｅｄ ｍａｘｉｍｕｍ ｐｅａｋ ａｔ １２ ｈｏｕｒｓ，ｔｈｅｎ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ａｆｔｅｒ ｔｈｅｎ．ＣｏＮＣＬＵｓｌｏＮ Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｔｏ ｍａｋｅ ｔｈｅ ａｃｕｔｅ ｈｅｐａｔｉｃ ｉｎｊｕｒｙ ｍｏｄｅｌ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ＡＺＡ ｉｎ ｍｉｃｅ ａｒｅ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄ １５０ ｍｇ／ｋｇ ＡＺＡ ａｎｄ ｔｒｅａｔｅｄ ｆ０ｒ １２ ｈｏｕｒｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅｓ；ａｚａｔｈｉｏｐｒｉｎｅ；ｍｏｄｅｌｓ，ａｎｉｍａｌ；ｔｒａｎｓａｍｉｎａｓｅｓ；ｍｉｃｅ 肝纤维化动物模型的制作是研制预防与治疗肝 纤维化药物的重要前提［ ．由于尚缺乏与人类肝纤 维化病理过程相似的理想动物模型，目前多采用给 实验动物施以不同性质、不同剂量以及不同作用方 式的肝毒剂，制作不同类型的肝纤维化模型．常用的 肝毒剂有四氯化碳、他克林、Ｄ一半乳糖胺、乙硫氨酸 及二甲基亚硝胺等［ ，引．硫唑嘌呤（ａｚａｔｈｉｏｐｕｒｉｎｅ， ａＺＡ）是细胞代谢抑制剂，在体内具有肝毒性¨ｊ．本 试验观察了ＡＺＡ诱导建立小鼠急性肝组织损伤模 型的最佳制作条件，旨在为治疗肝组织损伤药物的 研制提供实验依据． 【收稿日期】２００６－１０－２１ ＊［通讯作者】南极星（１９６３一），男（朝鲜族），教授，博士， 研究方向为抗肝纤维化药物活性成分的研究． １ 材料与方法 １．１材料实验动物取昆明种小鼠，雄性，体重为 维普资讯 http://www.cqvip.com 延边大学医学学报２００７年３月 第３０卷第１期 ・ ４１ ・ １８－－２２ ｇ，由延边大学医学部实验动物科提供，实验 前适应性饲养１周．ＡＺＡ为美国Ｓｉｇｍａ公司产品； ，表１ 不同剂量ＡＺＡ对小鼠血清ＡＬＴ。ＡｓＴ活性的影响 ＡＳＴ试剂盒为日本Ａｒｋａｒａｙ公司产品；其他试 剂均为国产分析纯．ＳＰ．４４３０型全自动生物化学分 析仪为日本Ａｒｋａｒａｙ公司产品． １．２方法 １．２．１ ＡＺＡ溶液的制备ＡＺＡ溶液用含有５０ ｇ／Ｌ 吐温一８Ｏ的生理盐水临用前配制． １．２．２ ＡＺＡ给药剂量对小鼠急性肝组织损伤模型 制作的影响 取昆明种雄性小鼠５０只，随机分为 ５个组，即正常组及大、中、小、低剂量ＡＺＡ组，每组 各为１０只．分别给予大、中、小、低剂量ＡＺＡ组小鼠 ２００，１５０，１００，５０ ｍｇ／ｋｇ ＡＺＡ溶液，灌胃给予正常组 小鼠等量生理盐水，剂量均为０．５ ｍＬ／ｋｇ．给药后禁 食２４ ｈ，颈动脉取血，以２ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心３０ ｍｉｎ，取 血清，测定ＡＳＴ，ＡＬＴ值． １．２．３ ＡＺＡ作用时间对小鼠急性肝组织损伤模型 制作的影响 取昆明种雄性小鼠９０只，随机分为 ９个组，即正常组及给药４，８，１２，１６，２０，２４，２８，３２ ｈ 组，每组各为１０只，分别灌胃给予各给药组小鼠 １５０ ｍｇ／ｋｇ ＡＺＡ，给药后即开始禁食，分别于４，８， １２，１６，２０，２４，２８，３２ ｈ颈动脉取血，以２ ０００ ｒ／ｍｉｎ 离心３０ ｍｉｎ，取血清，测定ＡＳＴ，ＡＬＴ值． １．２．４统计学处理所有测定结果应用ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ｐｒｏｇｒａｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ， ＵＳＡ）软件进行统计学分析，以ｏｎｅ—ｗａｙ ＡＮＯＶＡ及 Ｔｕｒｋｅｙ’Ｓ ｍｕｈｉｐｌｅ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ方法进行多组间比 较．ＡＳＴ，ＡＬＴ测定值以均数±标准偏差（ ±ＳＤ） 表示． ２结果 ２．１ ＡＺＡ给药剂量对小鼠急性肝组织损伤模型制 作的影响结果表明，小鼠血清中ＡＳＴ，ＡＬＴ值随 给药剂量的增加而上升，呈现良好的量效关系，见 表１． ＊与正常组比较，Ｐ＜０．０５ ２．２ ＡＺＡ作用时间对小鼠急性肝组织损伤模型制 作的影响 结果表明，给药组小鼠血清中ＡＳＴ， ＡＬＴ值随ＡＺＡ作用时间的改变而发生变化，在给 药１２ ｈ时小鼠血清中ＡＬＴ，ＡＳＴ值达到最高值，与 正常组比较有显著性差异（Ｐ＜０．０１），之后小鼠血 清中ＡＬＴ，ＡＳＴ值逐渐下降，见表２． 表２ 不同给药时间对小鼠血清ＡＬＴ。ＡＳＴ值的影响 与正常组比较，＊Ｐ＜０．０５，＊＊Ｐ＜０．０１ ３讨论 ＡＺＡ是６一甲基嘌呤的咪唑衍生物，在体内可引 发中毒性肝炎，加重肝功能损伤，引起黄疸＿５ Ｊ．ＡＺＡ 致肝组织损伤的机制尚不清楚，一般认为是因它的 代谢物在肝组织内蓄积，干扰特殊代谢过程，引起肝 组织发生脂肪变性或坏死，所致肝组织损伤程度与 给药剂量及给药时间有关 ．血清中ＡＳＴ， 值 可比较灵敏地反映肝组织损伤程度．本实验结果表 明，ＡＺＡ的给药剂量在５０～２００ ｍｇ／ｋｇ范围时，小 鼠血清ＡＳＴ，ＡＬＴ值随给药剂量的增加而升高，给 药剂量为１５０ ｍｇ／ｋｇ时，药物作用１２ ｈ时小鼠血清 维普资讯 http://www.cqvip.com ４２ ・ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｙａｎｂｉａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｍａｒ．２００７ ｖｏＩ．３０ Ｎｏ．１ ・中ＡＳＴ，ＡＬＴ值达最高值，提示利用ＡＺＡ制作急性 ｔａｃｒｉｎｅ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｈｅｐａｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ：ｒｏｌｅ ｏｆ ｔｈｅ ｓｙｍｐａｔｈｅｔｉｃ 肝组织损伤小鼠模型时，ＡＺＡ的最佳给药剂量为 ｎｅｒｖｏｕｓ ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ ｈｙｐｏｘｉａ．ｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｊ Ｐｈａｒ． １５０ ｍｇ／ｋｇ，最佳作用时间为１２ ｈ． ｍａｃｏｌ Ｅｘｐ Ｔｈｅｒ，１９９７，２８２（３）：１ ５９１． ［参考文献］ ［４］Ｌｅｅ ＡＵ，ＦａｒｒｅＵ ＧＣ．Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ａｚａｔｈｉｏｐｒｉｎｅ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｉｎｊｕｒｙ ｔＯ ｈｅｐａｔｏｃｙ ｒｏｌｅｓ ｏｆ ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ ｄｅｐｌｅｔｉｏｎ ａｎｄ ｍｉｔｏ． ［１】王晓萍，周语平．肝纤维化动物模型制作的研究进展 ｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｉｎｊｕｒｙ［Ｊ］．Ｊ Ｈｅｐａｔｏｌ，２００１，３５（６）：７５６． ［Ｊ】．甘肃中医，２００６，１９（１）：１３． ［５］来永广，孙成梅，陈春芬，等．硫唑嘌呤致急性肝衰竭 ［２】彭小东，王波，王天才．四氯化碳皮下注射构建大鼠肝 １例［Ｊ］．宁夏医学院学报，２００５，２７（４）：３３５． 纤维化模型的研究［Ｊ】．江西医学院学报，２００５， ［６］ Ａｍｉｎ Ａ，Ｈａｍ＿ｚａ ＡＡ．Ｈｅｐａｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｈｉｂｉｓ． ４５（２）：５． ｃ ｓ， Ｒｏｓｍａｒｉｎｕｓ ａｎｄ Ｓａｌｖｉａ Ｏｎ ａｚａｔｈｉ０ｐｒｉｎｅ－ｉｎｄｕｃｅｄ ［３］ Ｓｔａｃｈｌｅｗｉｔｚ ＲＦ，Ａｒｔｅｅｌ ＧＥ，Ｒａｌｅｉｇｈ ＪＡ，ｅｔ ａ１．． ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｉｎ ｒａｔｓ［Ｊ］．Ｌ Ｓｃｉ，２００５，７７（３）：２６６．囹 Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｎｅｗ ｍｏｄｅｌ ｏｆ 相转移法合成萘丁美酮 孙良鹏 ，姜哲 ，朴虎日卜 （１．延边大学药学院；２．延边大学医院药剂科：吉林延吉１３３０００） ［摘要］ ［目的］研究萘丁美酮的合成工艺．［方法］以６．羟基．２ 萘甲醛为原料，经成醚、还原、氯代、缩 合及水解等反应合成目标化合物．［结果］产物及中问体结构经 Ｈ－ＮＭＲ，ＩＲ，ＭＳ确认，总产率为 ５Ｏ．４％．［结论］相转移法合成萘丁美酮具有所用试剂易得，操作方法简便，反应条件温和，成本较低等 优点． ［关键词］ 化学，药物；相转移催化剂；合成 ［中图分类号］Ｒ９７７．１５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］ １０００．１８２４｛２００７）０１．００４２．０３ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｎａｂｕｍｅｔｏｎｅ ｂｙ ｐｈａｓｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｃａｔａｌｙｓｔ ＳＵＮ Ｌｉａｎｇ－ｐｅｎｇ ，ＪＩＡＮＧ Ｚｈｄ，ＰＩＡＯ Ｈｕ．ｒｉ （１．Ｙａｎｂｉａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｙａｎｂｉａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ：ｙｎｎｊｉ １３３０００，Ｊｉｌｉｎ，Ｃｈｉｎａ） ＡＢＳＴＲＡＣＴ：０ＢＪＥＣＴＩＶＥ Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｐｒｏｃｅｓｓ ｆｏｒ ｎａｂｕｍｅｔｏｎｅ．ＭＥＴＨＯＤＳ Ｎａｂｕｍｅｔｏｎｅ ｗａｓ ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ６一ｈｙｄｒｏｘｙ—ｎａｐｔｈａｌｅｎｅ一２一ｃａｒｂａｌｄｅｈｙｄ ｔｈｒｏｕｇｈ Ｗｉｌｌｉａｍｓｏｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ，ｈｙｄｒｏｇｅｎａｔｉｏｎ， ｃｈｌｏｒｉｎａｔｉｏｎ，ｃｏｎｄｅｎｓａｔｉｏｎ，ａｎｄ ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｒｅａｃｔｉｏｎ．ＲＥＳＵＬＴＳ Ｔｈｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｏｆ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅ ａｎｄ ｔａｒｇｅｔ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ Ｈ—ＮＭＲ．ＩＲ ａｎｄ ＭＳ．Ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｙｉｅｌｄ ｗａｓ ５０．４％．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ Ｔｈｅ ｐｈａｓｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｃａｔａｌｙｓｔ ｈａｓ ａｄｖａｎｔａｇｅｓ ｏｆ ｓｉｍｐｌｅ ｓｔａｒｔｉｎｇ ｍａｔｅｒｉａｌ，ｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔ ｏｐｅｒａｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｍｉｌｄ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉａｌ；ｐｈａｓｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｃａｔａｌｙｓｔ；ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ［收稿日期］２００６。１１—２７ ＊［通迅作者］ 朴虎日（１９５７一），男（朝鲜族），教授，医学硕 士，研究方向为化学药物的合成与活性成分分析．
