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大豆疫霉根腐病的发生和防治研究进展

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维普资讯 http://www.cqvip.com 植保技术与推广Plant Protection Technology叠nd Extension,2002,Vo1.22,No.7 大豆疫霉根腐病的发生和防治研究进展 朱振东 (中国农业科学院作物品种资源研究所,北京100081) 中图分类号:¥435.651 文献标识码:A 文章编号:1004—7255(2002)07一O040—03 由大豆疫霉菌(Phytophthora sojae Kaufmann& 色病斑。 Gerdemann,异名 megasperma v8r.sojae Hildebrand, 2病原学研究 megasperma f.sp.glycinea Kuan and Erwin,尸.sojae 2.I 形态特征及生物学特性大豆疫霉菌在PDA培 £sp.glycinea Fails et a1.J引起的大豆疫霉根腐病是 养基上生长缓慢,菌落形态均匀,白色,边缘不整齐;气 严重影响大豆生产的毁灭性病害之一。该病害1948年 生茵丝致密,呈棉絮状;在利马豆、玉米粉、Ve汁等培养 首次发现于美国印第安纳州,并迅速成为美国大豆的重 基上生长较快,菌落均匀,边缘整齐。菌丝宽3—9 tim, 要病害。50 a来,人们对大豆疫霉根腐病进行了广泛深 易卷曲;菌丝珊瑚状,无隔,近直角分枝,分枝处稍微缢 入的研究,但该病害仍未得到持续有效的控制。目前大 缩;菌丝可形成膨大体和厚垣孢子。不同分离物的培养 豆疫霉根腐病已广泛发生于世界大部分大豆生产区,其 特征和形态变化很大。多数分离物的最适生长温度为 中在美国、加拿大、阿根廷、意大利等主要大豆生产国造 25—28℃,最高为32—35℃.最低为5℃。孢囊梗简 成严重损失。如1998年美国因大豆疫霉根腐病造成的 单,顶生游动孢子囊。游动孢子囊倒梨形或椭圆形,无乳 产量损失为114.9万t,仅次于大豆胞囊线虫的为害。鉴 突,大小为42—65 tim X 32—53 tim。孢子囊萌发时将游 于大豆疫霉根腐病的破坏性和毁灭性,大豆疫霉菌从 动孢子释放到薄壁泡囊,泡囊迅速膨大和破裂;有时游 1986年开始被列为我国的对外检疫重要性病原菌. 动孢子滞留在游动孢子囊内并萌发,产生芽管穿透孢子 1993年被国家正式公布为一类进境植物检疫重要性病 囊壁。游动孢子囊也可直接萌发,其作用相似于分生孢 原菌。 子。游动孢子囊不具脱落性,内层出。游动孢子卵圆形, 1 大豆疫霉根腐病的发生与为害 一端或两端钝圆,侧面平滑,有两根鞭毛,尾鞭长是茸鞭 大豆疫霉根腐病可在大豆的任何生育阶段发生和 长的4—5倍;游动孢子的运动期可持续几天,在休止孢 为害。在水淹条件下引起种子腐烂、出苗前死亡和出苗 形成之前,运动变得缓慢和颠簸;休止孢以芽管方式直 后钩状期死亡。苗期症状表现为近地表植株茎部出现水 接萌发。芽管在接触固体表面时常膨大形成附着胞,但 渍状病斑、根系腐烂、叶片变黄萎蔫,严重时猝倒死亡。 很快从附着胞恢复菌丝的正常生长;有时休止孢萌发产 成株期植株受侵染后首先下部叶片变黄,随后上部叶片 生次生游动孢子;偶尔,芽管的顶端形成小型游动孢子 逐渐变黄并很快萎蔫,植株死亡后叶片仍不脱落;近地 囊。游动孢子产生的最适温度为20℃,最低温度为5 面茎部病斑黑褐色,并可向上扩展至10 11节位.茎的 ℃,直接萌发的最适温度为25℃,间接萌发的最适温度 皮层及髓变褐,中空易折断,根腐烂,根系极少;未死亡 为14℃。 病株荚数明显减少,空荚、瘪荚较多,籽粒皱缩。成株期 大豆疫霉菌有性生殖为同宗配合。雄器多为长形, 感病植株的病茎节位也有病荚产生,其症状为绿色豆荚 侧生,偶尔围生。藏卵器球形或亚球形,直径29 58 基部最初出现水渍状斑,病斑逐渐变褐并从荚柄向上蔓 tim,壁薄。藏卵器受精后发育成卵孢子。卵孢子萌发产 延至荚尖,最后整个豆荚变枯呈黄褐色,种子失水干瘪, 生芽管,芽管随后形成茵丝或产生游动孢子囊。卵孢子 种皮、胚和子叶均可带菌。高度耐病品种的成株一般表 产生的最适温度为18—23℃,27℃时萌发最快。 现为主根变色,次生根腐烂,植株不死亡,但矮化和叶片 2.2 毒力分布大豆疫霉菌具有高度的变异性。1959 轻微褪绿,与缺氮或水淹后的症状相似,这些轻微症状 年Hildebrand发现不同大豆疫霉菌分离物在毒力上的 称之隐性损害,造成的减产可达40%。另外,大雨后叶 差异,认为大豆疫霉菌存在生理株系。1965年Morgan和 部也可以产生症状,在幼嫩小叶产生边缘为黄色的亮褐 Hartwig首次报道了大豆疫霉菌的生理专化性,描述了1 收稿日期:2001—12—07 基金项目:国家自然科学基金(39970497),国家十五科技攻关计划(2001BA509B0608) 作者简介:朱振东(1965一),男,湖南慈利人,副研究员,主要从事品种资源抗病性及大豆病害综合防治研究工作。 ● 维普资讯 http://www.cqvip.com 植保技术与推广PI8nt Pr0tection TechnoIogy and Extension,2002,Vo1.22 1 !:! ! 号和2号小种。1972年Schnfitthenner在美国北部地区 发现对当时推广的抗病品种Harosoy 63具有毒力的分 离物并鉴定为3号小种,随后4—9号小种也相继在北 部地区和加拿大被鉴定。之后,新的大豆疫霉菌生理小 种便不断产生。迄今,国外已有53个生理小种被鉴定。 2.3 分离方法 由于大豆疫霉菌在普通培养基上生 长缓慢,一般的病原菌分离方法很难分离,必须利用选 择性培养基。常用的选择性培养基有PVP、PARP和PB— NIC 3种。选择性培养基一般用稀释Vs汁琼脂、胡萝卜 汁琼脂、利马豆琼脂或玉米粉琼脂作为基本培养基,再 加入真菌和细菌抑制物,在每l 000 ml基本培养基中, PVP选择性培养基含0.01 g匹马霉素、0.2 g万古霉素 和0.1 g五氯硝基苯;PARP选择性培养基含0.01 g 匹马霉素、0.25 g氨苄青霉素、0.01 g利福平和0.1 g 五氯硝基苯;PBNIC选择性培养基含0.01 g苯菌灵、 0.054 g五氯硝基苯、0.04 g异菌脲、0 1 g硫酸链霉 素、0 01 g氯霉素。在实际应用中由于PVP和PARP中 的匹马霉素在高温和光照条件下极易分解,不适于数 量大、时间长的田间采集分离工作,而PBNIC中的抑菌 剂除异菌脲(可以去掉此成分)外,其他成分可加入培 养基中直接灭菌,因此,PBNIC是分离大豆疫霉菌的实 用培养基。恶霉灵(0.02—0.05 mg/L)加入3种培养基 中可以部分抑制腐霉菌的生长。选择性培养基不可能 完全根除所有的污染真菌和细菌。最有效的分离方法 是翻转培养基,使其在接种的病组织块之上以减少污 染细菌的竞争,而大豆疫霉菌可透过培养基向上生长。 在无选择性培养基时也可用翻转培养基的方法在普通 培养基上分离 ‘ 癌霉菌。 大豆瘦霉酶不i I能直接从土壤中分离。较为有效 的土壤分离 大豆叶片诱钓法:将20 g土壤均匀 铺放存直径: 00 mm的玻璃培养皿中,加8 mL蒸馏水 均匀湿润f,壤,加盖并用封口膜封紧,避免水分蒸发, 然后培滓皿倒置在培养箱内,在25℃黑暗条件下孵育 7 d左右。加蒸馏水于培养皿至高出土面6 mm左右,用 Jl发水纸将水面清沽干净后 即加入20 30个不含抗 大豆疫霉菌基因或感病大豆叶碟(如Williams和合丰 5 )。加入叶碟后培养皿放回培养箱,2 h后用消毒镊 子博叶碟取出,并刷无菌纸巾吸干数秒,叶碟放人疫霉 菌选择性培养基中,然后在25℃黑暗条件下培养。3 d 后大豆疫霉菌的菌丝从侵染(水渍状)叶碟边缘长出 0.5~3 mm,很容易鉴别。最近,在叶碟诱钓方法的基础 上我们建立了一种更简单、有效的分离方法。该方法是 将诱钓游动孢子的叶碟直接接种不含抗大豆疫霉菌基 因或感病的大豆植株,再对病株进行选择性或非选择 性分离获得大豆疫霉菌。此方法利用寄主的选择性,十 分有效地排除腐霉菌干扰和细菌的污染,直接获得纯 化菌株。从土壤中分离大豆疫霉菌的另外一个有效的方 法是大豆苗生物检测法:水淹土壤1 h,排水、风干至土 壤含水量为30%~35%,将装土壤的容器放人塑料袋 中并封紧,防止进一步干燥,在室温下孵育2周(从水淹 开始计算),此阶段卵孢子萌发形成游动孢子囊。之后, 播种感病大豆品种,浇适量的水或覆盖湿蛭石,并放人 塑料袋中保湿以保证种子萌发。播种3 d后,当苗根为 5 cm时水淹24 h,排水后在温室培养10 d,此期间豆苗 出土并猝倒,大豆疫霉菌很容易从崩溃的胚轴上分离。 3 病害发生规律 在感病品种和耐病品种的根部和茎部可以形成大 量的卵孢子。这些卵孢子随病残体进入土壤,存活在病 残体上或病残体降解后直接存活在土壤中。在无寄主的 情况下,卵孢子在土壤中能存活数年。卵孢子萌发产生 孢子囊及游动孢子的释放是导致病害发生的必要条件。 对卵孢子萌发的温度、土壤含水量及卵孢子萌发时间的 研究结果表明,在土壤温度为18~27℃、土壤含水量 高于20%时,大豆疫霉菌卵孢子就可以萌发。萌发的最 适温度为24℃,最适含水量为35%。在24℃条件下, 卵孢子萌发所需要的最短时间为2.5~3 d。卵孢子萌 发产生游动孢子囊,当土壤被水饱和或被水淹,游动孢 子囊释放游动孢子产生初次侵染。游动孢子囊也可以在 被侵染的大豆根表上形成,产生再次侵染源。游动孢子 在水饱和的土壤中可以游动短距离(约1 cm),但主要 随流水扩散。大豆疫霉根腐病基本上是一个单循环病 害,次生侵染源不提高病害损失。 影响土壤湿度的因子如土壤类型、排水条件、土壤 疏密度对病原菌的致病力表达至关重要。大豆疫霉根腐 病多发生于地头、田间低洼或积水处,土壤黏重、压实的 地块一般发病最重。平作栽培的发病率明显高于垄作栽 培。 大豆对大豆疫霉菌的抗性为小种专化性抗性。大豆 品种间有明显的抗感差异。品种的感病性是导致大豆疫 霉根腐病发生的主要因素之一。 概括来说,土壤含水量、感病品种和大豆疫霉菌生 理小种的变化是决定大豆疫霉根腐病发生的关键因子。 大量降雨、黏重土壤、免耕地、平作、密植、重茬有利于疫 霉病的发生。 4 防治方法 4 1 抗病资源筛选及抗病品种利用 大豆与大豆疫 霉菌的相互关系是基因对基因的关系。迄今,在大豆中 已经鉴定了13个抗大豆疫霉菌的显性单基因(Rps)。利 用抗病品种仍然是国外防治大豆疫霉根腐病唯一有效 的方法。 我国为大豆的起源地,存在丰富的抗大豆疫霉根腐 病资源。“九五”期间,我们鉴定了1 600多份大豆种质 维普资讯 http://www.cqvip.com 42 植保技术与推广Plant Protection Technology and Extension,2002,Vo1.22,No.7 》l羹 l植保机构作用巨大,基层队伍状况堪忧 论坛《植保机构作用巨大 基层队伍状况堪忧 、 张互助,李立秋 (全国农业技术推广服务中心,北京100026) 中图分类号:C936 文献标识码:C 文章编号:1004—7255(2002)07—0042—03 植物保护队伍是农技推广体系的重要组成部分, 承担着农作物病、虫、草、鼠害的监测、预报、防治、检疫 及新农药、新药械的试验示范推广和安全使用等公益 2)根据新形势及时调整工作重心。为了适应当地 种植业结构调整的需要,根据本地病虫动态,及时完善 测报网点和调整病虫监测对象。如云南省根据本省主 性职能,是农业可持续发展、农民增收、农产品安全优 质的重要保障。在农业发展新阶段,各级植保技术推广 部门积极探索机制创新、服务创新,创造了不少新经 验,涌现了一批好典型。但随着县、乡机构改革的不断 深入,基层植保队伍的稳定与发展也面临新的困难。 要病虫种类的变化,调整、建立了55个省级重大病虫 系统测报点,271个地、县级测报点,测报专、兼职技术 人员达781人,基本上实现了对重点地区、优势作物重 要病虫的系统监测。 3)成立植保专业队,对重大病虫害实行统防统治。 通过不断的改进、完善,植保专业队基本达到了作业机 械化、防治科学化、管理企业化、服务社会化,从而保证 了防治时间、防治效果,达到了降低成本和用药安全的 1 基层植保部门在改革中的创新经验 1)调整思路,转变观念,创新发展。从过去以粮食 作物为重点逐步转移到粮食作物与经济作物并重的轨 道上来,在确保粮食安全和经济作物优质、高产、高效 的前提下.与市场接轨。大力发展村级植保技术服务组 织,把为农民提供信息、技术和物资服务作为重要工 作,围绕广大农民增收进行产前、产中、产后植保系列 化服务。如河南省在98个县发展村级植保技术服务组 织上万个,开展县、乡、村连锁经营,解决了技术人员 少、推广经费缺、一家一户防治病虫难的问题。 要求。如辽宁省灯塔市建立植保专业队,对检疫对象稻 水象甲实行统防统治,不仅有效地控制了其为害。而且 带动了其他病虫害的防治。 4)不断提高人员素质,实行竞争上岗。一方面实行 考试考核、竞争上岗,做到明确职责、奖惩分明;另一方 面积极创造条件对广大植保人员进行培训,或派出进 修,提高素质。如云南省近5 8举办省级植保培训班20 对大豆疫霉菌1号生理小种的抗性,获得了600多份抗 及对大豆根部的入侵必须有较长时间的 5湿土壤条件。 病害严重的地块主要位于低洼积水处。在排水良好的土 病资源,其中以河南、安徽的抗性资源最为丰富。在黑龙 江省的主要栽培大豆品种中,合丰34、黑农36、东农 43、绥农8号、绥农11、抗线2号、垦农4号等为抗病品 种。 壤条件下病害往往不会严重发生。国外研究表明,周期 性干旱胁迫,可增加大豆疫霉根腐病的严重度,于旱时 及时灌溉可以减轻病害。土壤的松密度与病害的严重度 正相关。在机耕田块的拖拉机道和其两端转弯处由于土 4.2 药剂防治措施大豆疫霉根腐病为土传病害,可 在大豆的任何生育阶段为害。药剂防治比较困难。但筛 选高效、低毒和低残留的杀菌剂并建立合理的应用方 法,如种衣剂研制及种子处理方法的筛选,可以有效地 壤被压实,病害一般发生严重。因此,加强春耕提高土壤 疏松度及建立有效的排水系统可以减轻病害的发生。垄 作是控制病害发生的有效措施。 防治大豆疫霉根腐病在苗期的发生。一些杀菌剂,如甲 霜灵、安克・锰锌、甲霜灵・锰锌等,在离体条件下对大 豆疫霉菌具有很好地抑菌作用。其中以甲霜灵效果最 好。在活体条件下,甲霜灵和甲霜灵・锰锌能完全抑制 大豆疫霉菌对感病大豆品种的侵入,其药效期较长。均 在25d以上。 国外研究表明,任何单一的防治措施都不能持续有 效的控制大豆疫霉根腐病。由于大豆疫霉菌具有很高 的病原变异性,品种的抗性不可能持续,而耐病品种 对大豆疫霉根腐病的忍耐性不能达到较高的防治水 平。杀菌剂如甲霜灵并不是对所有的品种有效。各种 栽培措施虽可减轻损失,但不能提供完全的防治。因 此,只有进行综合治理才能持续有效地防治大豆疫霉 根腐病。 4.3 栽培控制措施 土壤湿度是影响大豆疫霉根腐 病的关键因素之一。在土壤中大豆疫霉菌卵孢子的萌发 

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